Способи виявлення
Існує 3 способи візуального виявлення нуклеоида в бактеріях:
- світлова мікроскопія;
- фазово-контрастна мікроскопія;
- електронна мікроскопія.
Залежно від способу підготовки препарату та методу дослідження нуклеоид може виглядати по різному.
Світлова мікроскопія
Для виявлення нуклеоида за допомогою світлового мікроскопа бактерії попередньо фарбують таким чином, щоб нуклеоид мав колір, відмінний від решти клітинного вмісту, інакше ця структура не буде видно. Також обов’язкова фіксація бактерій на предметному склі (при цьому мікроорганізми гинуть).
Через об’єктив світлового мікроскопа нуклеоид виглядає як бобовидной утворення з чіткими межами, яку займає центральну частину клітини.
Методи фарбування
У більшості випадків для візуалізації нуклеоида методом світлової мікроскопії використовують наступні способи забарвлення бактерій:
- по Романовському-Гімзе;
- метод Фельгена.
При фарбуванні за Романовскому-Гимзе бактерії попередньо фіксуються на предметному склі метиловим спиртом, а потім протягом 10-20 хвилин просочуються барвником з рівної суміші азура, эонина і метиленового синього, розчинених у метанолі. В результаті нуклеоид стає фіолетовим, а цитоплазма блідо-рожевою. Перед мікроскопією фарба зливається, а препарат промивається дистилятом і висушується.
У методі Фельгена застосовується слабо кислотний гідроліз. В результаті звільнена дезоксирибоза переходить в альдегидную форму і взаємодіє з фуксинсернистой кислотою реактиву Шиффа. У підсумку нуклеоид стає червоним, а цитоплазма набуває синій колір.
