Селенитовый бульйон — середовище збагачення з селективними властивостями, призначена для виділення патогенної бактерій роду сальмонела (лат. Salmonella). Вона дуже ефективна при необхідності виявити саме цей патогенний організм в числі інших представників кишкової мікрофлори. Середа використовується як для клінічної діагностики, так і в санітарних цілях при перевірці харчових продуктів.
Загальна характеристика
Селенитовый бульйон готується на основі порошку, який представляє собою гомогенізовану суміш різних компонентів складу. Колір сухого матеріалу може бути світло-жовтим або кремовим, залежно від типу середовища. Порошок має сипучими властивостями.
Готовий селенитовый бульйон являє собою рідку прозору середу світло-жовтого кольору. Ця маса заливається в ємності, куди проводиться посів для подальшої інкубації.
Існує три основних види селенитового бульйону:
- середовище в чистому вигляді — підходить для виділення сальмонел як клінічного, так і з санітарного матеріалу;
- з додаванням маніту (двокомпонентний бульйон) — призначений для роботи тільки з клінічним матеріалом;
- цистеїн-селенитовая середовище — може використовуватися для виділення сальмонел з патологічного біоматеріалу пацієнта (кал, сеча та ін).
Ці типи трохи відрізняються компонентним складом і особливостями дії.
Основне завдання селенитового бульйону — сприяти накопиченню сальмонел, пригнічуючи ріст супутньої мікрофлори. Це дає можливість не тільки виявити патоген у матеріалі, але і згодом пересіяти його на агар. Середа була розроблена Лейфлером, який першим виявив селективну дію селенита відносно сальмонел.
Склад
До складу селенитового бульйону входять:
- гідролізат казеїну;
- лактоза;
- фосфат натрію;
- гидроселенит натрію.
Селеніт-цистеиновая середа, крім цих компонентів, містить L-цистеїн і гідрофосфат натрію. Склад бульйону з манітом відрізняється тим, що замість гідролізату казеїну туди входить пептичний перевар тваринної тканини. Лактоза в такому середовищі відсутня, але зате є маніт. Останній виступає в якості ферментируемого субстрату і забезпечує буферні властивості бульйону.
Всі компоненти порошку, крім гидроселенита натрію, умовно називають частиною А, а селективне речовина — частиною Б.
Принцип дії та властивості середовища
Селенитовый бульйон працює як накопичувальна середовище з селективним дією. Виборчий ефект забезпечується за рахунок токсичності селенита, який пригнічує ріст більшості мікроорганізмів. При цьому бактерії роду сальмонела здатні відновлювати це з’єднання, тим самим усуваючи токсичний ефект для власних клітин. Проте в результаті реакції утворюється луг, що знижує шкідливий вплив селенита на ріст супутньої мікрофлори, у зв’язку з чим виникає необхідність стабілізувати pH. Цю функцію виконують бактерії, ферментирующие лактозу з утворенням кислоти. Буферність середовища забезпечується фосфатом.
У двокомпонентному бульйоні pH стабілізується за рахунок маніту. Середа з цистеїном покращує селективну дію відносно сальмонел. Такий бульйон ефективний для контролю інфекційного фону у пацієнтів з негострої стадією захворювання або реконвалесцентів.
Прояв ростових характеристик референтних штамів в середовищі можна спостерігати після закінчення 12-24 годин з моменту початку інкубації. При цьому сальмонели утворюють безбарвні колонії.
Особливості приготування
Приготування середовища здійснюють у два етапи. Спочатку роблять розчин з селективним компонентом з розрахунку 4 грама селенита натрію на літр дистильованої води. Потім додають 19 грам основного порошку (частина А). Розчин ретельно перемішують і підігрівають до повного розчинення частинок, після чого заливають в стерильні пробірки.
При приготуванні важливо стежити за температурним режимом, оскільки середовище нестійка до перегріву. Стерилізацію бульйону можна здійснювати тільки на водяній бані або ж використовувати струмінь пари. Автоклавування середовища категорично неприпустимо.
