Суть методу фарбування
Перед тим як розпочати фарбування, готують мазки досліджуваних бактерій. Для цього на предметне скло капають воду і бактеріальної петлею додають туди культуру мікроорганізмів. Потім, після повного висихання води, мазок фіксують – предметне скло проносять кілька разів над полум’ям пальника. Фарбування мазків за Грамом більш ефективно, ніж фарбування живих бактерій – з мертвими клітинами краще зв’язуються молекули барвника.
Фарбування проводиться в кілька етапів:
- На фіксований мазок накладають невеликі шматочки фільтрувального паперу і наливають основний барвник – генціанвіолет або метиленовий синій.
- Через 3-5 хвилин знімають пофарбовану фільтрувальний папір і заливають мазок розчином Люголя на 1 хвилину. При цьому препарат темніє.
- Зливають розчин Люголя і обробляють мазок чистим етиловим спиртом: капають кілька крапель на препарат, через 20 секунд зливають. Процедуру повторюють 2-3 рази.
- Промивають скло з досліджуваним препаратом дистильованою водою.
- Проводять додаткове фарбування – дофарбовували препарат фуксином. Через 1-2 хвилини барвник змивають.
- Після висихання води вивчають під мікроскопом мазок. Грампозитивні бактерії будуть мати синьо-фіолетовий колір, грамнегативні – рожевий або червоний.
