Причини різного характеру фарбування
Як було описано вище, при фарбуванні бактерій за Грамом грампозитивні бактерії забарвлюються у синьо-фіолетовий колір, а грамнегативні – в червоний або рожевий. Причина диференціального фарбування бактерій за цим методом полягає в тому, що після потрапляння в клітку розчинної форми генціанвіолета барвник переходить у нерозчинну йодну форму. Під час обробки бактерії етиловим спиртом під дією цього неполярного розчинника з мембрани екстрагуються ліпіди. Після цього мембрана стає пористою і більше не є суттєвою перешкодою для вимивання барвника. Однак пептидоглікан більш стійкий до дії неполярних розчинників, в тому числі і спирту. Саме він перешкоджає вимиванню барвника, тому бактерії з товстим муреиновым шаром забарвлюється в синьо-фіолетовий колір (грамположительно), і після обробки спиртом свій колір не змінюють.
Тонкий муреиновый шар грамнегативних бактерій не може втримати в клітці молекули барвника, тому після дії спирту вони стають безбарвними – забарвлюються грамотрицательно.
Після впливу на мазок фуксином при фарбуванні за Грамом грампозитивні бактерії залишаються синьо-фіолетовими, а грамнегативні набувають рожево-червоний відтінок.
